42岁一次收获9颗囊胚，胚胎培养的魔鬼细节在这里
今天我们分享的是一个大龄姐姐的案例。M女士来到日本英医院的时候，已经42岁了，在最近的一次的微刺激方案中，取卵12颗，采用pizeo-ICSI的受精方式，其中有10颗卵子成熟并顺利受精分裂，最终培养9颗囊胚！
不过M女士并不是一开始就很顺利的。她在国内第一次拮抗方案“颗粒无收”，来到日本英医院以后，医生为她调整为微刺激方案，果然第二次第三次进周时都有不错的成绩。
下面是M女士进周记录
1、2018年9月国内进周，拮抗方案，采卵10颗，很遗憾都没有发育到囊胚。
2、2019年转战日本英医院，8月进周，医生根据她的情况及时调整了方案，采用微刺激方案，采卵10颗，4颗囊胚，2颗通过了PGT筛查。
3、2019年12月在英医院第二次进周，微刺激方案，采卵12颗，9颗到达囊胚。正在等待PGT结果。
从全军覆没，到一次收获9颗囊胚，三次取卵的获卵数量差不多，但是养囊结果一次比一次好，这也印证了实验室技术对胚胎培养的重要性。
大家都知道，每个生殖中心的促排方案和用药并没有太大差别，重要的在于精子卵子取出后如何培养。任何一个微小的细节都可能影响受精卵分裂。
不过，要用一两句话把胚胎培养的技术特点讲清楚，还真不是一件容易的事。所谓日本的匠人精神有时候需要细细品味，毕竟天使在想象中，魔鬼在细节里......
今天我们就一起来深入日本英医院的培养室，看看哪些原因会让受精卵中途掉队，而培养师又在做些什么帮助他们闯关呢？
精子和卵子的生命只有24-48小时，如果Ta们没有受精结合，就会走向凋亡。
如果Ta们相遇并且结合，新的受精卵就被赋予了生命力，细胞开始分裂生长，成为一个新的生命。
是的，从受精的那一刹那，神秘之门就被开启了。
这颗携带着新的遗传密码的受精卵，从一个受精卵开始倍数分裂。Day1分裂为2细胞；Day2分裂为4细胞；Day3分裂为8细胞 ...... Day5-6分裂为多细胞囊胚，然后会被放入子宫植入孵化或暂时冻结起来。
胚胎是住在培养室里的。
日本英医院的培养室保持24小时恒温恒湿超净，18台大型受精卵培养器全天候工作，24小时Timelapse系统及人员监控，温度、湿度、氧气浓度、氮气浓度等每一项，都是有经过反复校对的标准的。
英医院的培养师团队由约50名遗传学博士、硕士组成，每一位培养师都需要经过4年的训练才能从事临床实际操作。
下图就是日本英医院培养室的一个操作间，这里在培育的胚胎细胞，未来会成为一个个新的小生命。
下图这些方形容器就是胚胎居住的小区，为了减少每次开箱对胚胎的影响，每个培养箱只存放两人的胚胎。
这是胚胎住的房子——培养皿，看起来像隐形眼镜盒，里面放着培养液。在日本英医院必须经过3位以上的培养师核对后才能加入培养液。
在日本英医院，有一个特别的规定，每次培养师拿培养皿的时候，必须是用“右手托底，左手扶上”的方法，确保胚胎在移动过程中万无一失。这些微小的细节都是养囊成功率的保证。
培养师需要观察或操作的时候，会把培养皿取出来。日本英医院的检卵、受精、对胚胎的观察等操作是在下图这样特制的类似新生儿保育器的操作箱中进行。该操作箱是由英医院的创始人盐谷院长在婴儿恒温箱的基础上自主研发而成，箱内恒定37度，接近人体体温，并严格控制二氧化碳及氧气的比例，创造出一个模拟子宫的优良环境，更加有利于胚胎的发育。
胚胎培养成功后，如果不是移植鲜胚，就会被冻结和存储在液氮罐里成为冻胚。日本英医院会把这些胚胎专门放在有特殊加固的抗震房间中保存。这样的保存方式，胚胎保存20年之久也是毫无问题的。
培养液是胚胎生长发育的载体，也是胚胎营养的来源。
胚胎培养液的主要成分是水盐类能量物质、氨基酸、维生素、蛋白质等，这些成分组成模拟了胚胎在母体内发育的环境。它的酸碱度渗透压营养成分能量物质等，每个参数对于胚胎的成长都是至关重要的。
把受精卵往水里一丢就完事？可没有那么简单哦。
受精卵会新陈代谢不断产生废物，而且不同成长阶段的胚胎对培养液的要求不一样哦！在8细胞之前用丙酮酸和乳酸进行代谢，8细胞之后则需要更多的葡萄糖和氨基酸。所以及时更换培养液至关重要。
它们可不好伺候啊！培养师苦笑中......
整个培养过程中培养师需要连续性调整培养液的成分并及时更换掉废液。除了连续型培养液，还会用到钙离子增强、采用微电击増强分裂等操作，培养师就是胚胎的保育员。
此外，每次胚胎培养成功之后，培养师还会把这些培养液收集起来，为将来进行SEET法移植做准备，因为培养液中含有一部分胚胎代谢组织，对子宫内膜可以起到很好的刺激作用，更加有利于胚胎着床。
胚胎发育过程中需要及时监测，以便对发育过程中的问题及时干预处理。过去，培养师只能通过有限的几次将发育中的胚胎从培养箱中取出来，来观测判断胚胎的发育状况。现在有了Time-lapse培养系统，通过延时摄像技术，可以将胚胎几天的培养过程浓缩到数分钟内的视频中，不需要将胚胎取出观察。更加保证了胚胎发育环境的稳定性，减少接触外部细菌的机会。
这是Timelapse系统对受精卵从16小时到106小时的监测照片：
通过Timelapse系统，培养师可以静态观察，也可以对生长过程进行多位点观察和动态观察，从而更准确的判断胚胎的发育潜能，及时做出干预，比如处理受精以后的单核、多核现象等。
这么可爱的问题拜托不要到日本英医院问哦。在日本如果有1例胚胎差错就属于严重医疗事故，医院就要关门了......
日本英医院已经实施了全程条形码匹配，从患者带的手环、培养皿、精液调整器，所有的环节都是人工和电脑双重识别，从而杜绝了由于人工失误造成错误的可能性。
看到了这些强大的实验室技术加持，就不难理解囊胚培养是水到渠成的事了。在日本英医院，有80%的患者选择培养囊胚，而且在患者平均年龄39岁的情况下，英医院的平均养囊率达到50%。
综上，除了患者本身的情况以外，胚胎培养结果与医生的方案制定、生殖中心实验室技术水平都是息息相关的。希望大家综合评估适合自己的方案以及生殖中心，找到最顺畅的寻宝路径！
